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動(dòng)物組織中yan酸克倫特羅的測(cè)定

更新時(shí)間:2020-12-14 點(diǎn)擊次數(shù):1369

 

一、適用范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了測(cè)定動(dòng)物組織中yan酸克倫特羅的氣相色譜-質(zhì)譜法(GC-MS)(本實(shí)驗(yàn)樣品為雞肝)。

參考標(biāo)準(zhǔn)《NY/T 468-2006 動(dòng)物組織中yan酸克倫特羅的測(cè)定 氣相色譜-質(zhì)譜法》

 

二、提取步驟

準(zhǔn)確稱取5g試樣(j確至0.01g)于50 mL離心管中,加入15mL乙酸乙酯,再加入3mL 10%碳酸鈉溶液,加入勻質(zhì)子渦旋混勻2min,以5000r/min離心3min,吸取上層有機(jī)溶劑于50 mL離心管中,在殘?jiān)性俅渭尤?0mL乙酸乙酯渦旋混勻1min,以5000r/min離心3min,吸取有機(jī)溶劑合并提取液。在提取液中加入5mL 0.1mol/L的鹽酸溶液,渦旋混勻30s, 以5000r/min離心3min,吸取下層萃取液,重復(fù)同樣步驟萃取一次,合并兩次萃取液,用2.5mol/L氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH至5.2(±0.2)。

 

三、凈化步驟

SPE柱:月旭Welchrom® P-SCX小柱,規(guī)格:500mg/6mL;

活化:5mL甲醇,5mL水,5mL 30mmol/L鹽酸;

上樣:將萃取液全部上樣,棄去;

淋洗:5mL水,5mL甲醇,棄去并壓干;

洗脫:5mL 4%氨水甲醇,收集并壓干。

 

四、衍生

將洗脫液于50℃下氮吹至干,在衍生瓶中加入甲苯100μL,雙*基硅烷三fu乙酸胺(BSTFA)100μL,充分渦旋混勻后,置80℃烘箱中,反應(yīng)1h。冷卻至室溫后加入300μL甲苯,混勻,轉(zhuǎn)入進(jìn)樣小瓶,上機(jī)測(cè)定。

 

五、色譜條件

- 氣相色譜條件

色譜柱:WM-5MS, 30m×0.25mm×0.25μm;

進(jìn)樣口溫度:220℃;

升溫程序:70℃,保持0.6min,以25℃/min升溫至200℃,保持6min,以25℃/min升溫至280℃,保持5min;

載氣:高純氦氣(純度>99.999%);

進(jìn)樣方式:不分流進(jìn)樣;

恒流模式:0.9mL/min;

進(jìn)樣量:1μL。

 

- 質(zhì)譜條件

電離方式:電子轟擊電離源(EI);

電離能量:70eV;

傳輸線溫度:280℃;

離子源溫度:230℃;

四極桿溫度:150℃;

監(jiān)測(cè)方式:克倫特羅:86/212/262/277;

溶劑延遲:8min;

 

  

六、色譜圖或者加標(biāo)回收率結(jié)果

 

 

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