三个老外与一女做爰视频,四虎影视永久在线看无码,国产乱子轮在线一区二区,久久久亚洲av成人人漫画

服務(wù)熱線

021-50276769
網(wǎng)站導(dǎo)航
技術(shù)文章
當(dāng)前位置:主頁 > 技術(shù)文章 > Co柱常見問題及解決方案

Co柱常見問題及解決方案

更新時間:2021-12-07 點(diǎn)擊次數(shù):2110

在水溶液中,過渡金屬離子(如Zn2+、Cu2+、Ni2+和Co2+)與組氨酸和半胱氨酸間具有親和作用,IMAC正是以此親和力為基礎(chǔ)。將此方法延伸應(yīng)用,使金屬離子“強(qiáng)固定"于載體達(dá)到蛋白質(zhì)分級分離的目的。

應(yīng)根據(jù)具體應(yīng)用目的選擇固定于IMAC配基的金屬離子。三價陽離子,如Al3+、Ga3+和Fe3+或四價Zr4+更適合捕獲磷酸化蛋白質(zhì)和磷酸化肽,二價Cu2+、Ni2+、Zn2+和Co2+常用于純化His標(biāo)記蛋白質(zhì)。聯(lián)合使用四配位配基,可以確保固定化牢固,而且金屬離子(Ni2+、Co2+)保留兩個自由配位鍵與生物高分子相互作用時,接受能力更高,同時回收率和洗脫蛋白質(zhì)純度無明顯變化。

月旭金屬螯合親和介質(zhì)主推Ni(NTA/IDA)、Co(NTA),今天主要介紹下Co Tanrose 6FF(NTA)的基本參數(shù)與常見問題。


  • Co Tanrose 6FF (NTA)

Co Tanrose 6FF(NTA)是以高度交聯(lián)的6%瓊脂糖凝膠為基質(zhì),氨三乙酸偶聯(lián)于瓊脂糖而成,之后螯合Co2+。鈷NTA瓊脂糖凝膠FF特異性好,螯合鈷更穩(wěn)定,不易脫落,能耐受更高的還原劑,物理和化學(xué)穩(wěn)定性好。

  • 產(chǎn)品參數(shù)


微信截圖_20211207160708.png


柱子反壓高


原因分析:

1、填料被堵塞

解決方案:①裂解液中含有微小的固體顆粒,建議上柱前使用濾膜(0.22或0.45μm)過濾,或者離心去除。

②樣品中含有高濃度的核酸,加長破碎時間直至粘度降低,或者添加DNase I(終濃度5μg/ml),Mg2+(終濃度1mM),冰上孵育10-15分鐘。

2、樣品太粘稠

解決方案:有機(jī)溶劑或者蛋白穩(wěn)定試劑(如甘油等)可能會引起反壓增高,降低操作流速。

No.2

洗脫組分中沒有目的蛋白

原因分析:

1、蛋白可能是包涵體,不在上清中

解決方案:可以通過電泳檢測裂解液分析上清中是否含有目的蛋白,包涵體蛋白需要按照包涵體蛋白的純化方式。

2、表達(dá)量太低

解決方案:優(yōu)化表達(dá)條件。

3、目的蛋白結(jié)合比較弱,在洗雜步驟被洗下來了

解決方案:提高Wash Buffer的pH,或者降低咪唑濃度。

4、目的蛋白結(jié)合過強(qiáng),不容易洗脫下來

解決方案:降低Elution Buffer的pH值,或者增加Elution Buffer中咪唑濃度。

5、蛋白降解

解決方案:菌體破碎時添加一些蛋白酶抑制劑。在4°C下進(jìn)行純化操作。 

No.3

洗脫組分不純(含有多種蛋白)

原因分析:

1、洗雜不*

解決方案:增加Wash Buffer體積。

2、樣品中含有其他的組氨酸標(biāo)簽蛋白

解決方案:通過調(diào)節(jié)pH值,或者咪唑濃度來優(yōu)化洗雜條件。再使用其他的純化手段(如離子交換、疏水等)進(jìn)一步純化洗脫組分。

No.4

填料呈現(xiàn)褐色

原因分析:

緩沖液中含有DTT等還原劑

解決方案:適當(dāng)降低還原劑DTT的濃度,或者改用巰基乙醇。

No.5

上樣過程中蛋白發(fā)生沉淀

原因分析:

1、操作溫度太低

解決方案:室溫下進(jìn)行上樣。

2、蛋白發(fā)生聚集

解決方案:在樣品和所有的緩沖液中添加穩(wěn)定劑,如0.1%的TritonX-100或者Tween-20。

  • 訂購信息


微信截圖_20211207160748.png


2025 版權(quán)所有 © 月旭科技(上海)股份有限公司  備案號:滬ICP備05030427號-4 GoogleSitemap管理登陸 技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)

地址:上海市松江區(qū)明南路85號啟迪漕河涇(中山)科技園紫荊園10號樓 傳真: 郵件:linchen2@welchmat.com

關(guān)注我們

服務(wù)熱線

掃一掃,關(guān)注我們

乌克兰zoom| 人妻丰满熟妞AV无码区| 76少妇精品导航| 日本无码蜜桃波多野结衣| 人妻少妇一区二区三区| 伊人色综合久久天天五月婷| 亚洲无av在线中文字幕| 久久亚洲熟女CC98CM| 大肉大捧一进一出视频| 极品少妇高潮啪啪AV无码| 被多个男人调教奶头玩奶头| 无码专区aaaaaa免费视频| 日本大片a成人无码超级a| 热の综合热の国产中文网| AV无码专区亚洲AVL在线观看| 精品无码人妻一区二区三区18| 国产精品成人69XXX| 无码性午夜视频在线观看 | 女的让弄多少次下边才不紧| 国产成人精品视频一区二区不卡| 日本三级在线播放线观看| 久久婷婷成人综合色| 人妻女教师耻辱の教室| bl肉yin荡np公厕肉便| 双性娇喘浑圆奶水h男男| 国产亚洲精品A久久777777| 少妇人妻一区二区三区视频 | 午夜一区二区国产好的精华液| 一二三四在线观看免费高清视频| 成品网站w灬源码1688特点| 久久久久久曰本av免费免费| 色欲人妻综合AAAAA网| 握住校花两团雪乳高H| 99国产精品成人av片免费看| 国产美女被遭强高潮免费网站| 任你躁国语自产在线播放| 九月婷婷人人澡人人添人人爽| 我的变态室友(H)三攻一受 | 八个少妇沟厕小便漂亮各种大屁股| 呦交小U女国产精品视频| 51妺嘿嘿午夜福利|