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中藥成分液相分析常見問題——前沿峰

更新時(shí)間:2022-09-05 點(diǎn)擊次數(shù):1317


01

造成前沿峰的原因


1. 柱過載

每一根色譜柱都有其最大樣品承載量,當(dāng)樣品量過多時(shí)會(huì)出現(xiàn)超載現(xiàn)象,包括質(zhì)量過載和體積過載。

2.色譜柱損壞

色譜柱在長(zhǎng)時(shí)間使用之后就會(huì)導(dǎo)致硅膠填料的溶解,柱床崩解,從而柱效降低導(dǎo)致峰前沿。

3.峰干擾

兩個(gè)化合物共洗脫,即在大峰前有小峰出現(xiàn),色譜峰沒有分開。

4.樣品溶劑的影響

當(dāng)樣品溶劑的洗脫能力大大強(qiáng)于流動(dòng)相時(shí)會(huì)出現(xiàn)前沿峰。

具體就是說,樣品在色譜柱中均勻的往前移,我們通常會(huì)得到呈正態(tài)分布的的峰。當(dāng)樣品溶液進(jìn)樣后到達(dá)色譜柱的時(shí)間比較短,在未被流動(dòng)相充分稀釋時(shí),由于洗脫能力比較強(qiáng)的樣品溶劑存在,使部分樣品被洗脫的速度加快,快速通過色譜柱,最終導(dǎo)致峰前延。

中藥成分分析項(xiàng)目中,提取溶劑通常為乙醇、甲醇、乙酸乙酯等洗脫強(qiáng)度較強(qiáng)的溶劑,此時(shí)易發(fā)生“樣品溶劑的洗脫強(qiáng)度遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過流動(dòng)相"的情況,為避免前延峰出現(xiàn),可以用通過“流動(dòng)相稀釋提取液"或降低“進(jìn)樣體積"的方式。


02

應(yīng)用案例

蒡子的含量測(cè)定

色譜條件:

色譜柱:Ultimate® AKL-C18(4.6×250mm,5μm)。

流速:1.0mL/min;

流動(dòng)相:甲醇:水=1:1.1;

檢測(cè)波長(zhǎng):280nm;

柱溫:30℃;

進(jìn)樣體積:10μL。

色譜圖:

(1) 標(biāo)準(zhǔn)品


微信截圖_20220905144655.png

結(jié)論:牛蒡苷峰形前沿,將進(jìn)樣體積降低至5μL,結(jié)果如下:


(1) 標(biāo)準(zhǔn)品


微信截圖_20220905144705.png

(2) 供試品

微信截圖_20220905144741.png

結(jié)論:通過降低進(jìn)樣體積有效改善了牛蒡苷的峰形,結(jié)果可滿足《中國藥典2020版》中相關(guān)要求。


03

產(chǎn)品信息


微信截圖_20220905144800.png


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