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色譜柱填料污染原因剖析及解決方案

更新時(shí)間:2022-09-05 點(diǎn)擊次數(shù):1375

在色譜柱使用過程中,會(huì)出現(xiàn)柱壓高,峰形差等現(xiàn)象,其主要原因是色譜柱填料污染導(dǎo)致的,下面將對(duì)色譜柱填料污染進(jìn)行原因剖析及解決方案。


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—— 填料污染的原因剖析 ——

1)中藥類樣品成分復(fù)雜,如前處理過于簡(jiǎn)單,就很容易引起強(qiáng)保留成分積留在色譜柱入口端,導(dǎo)致色譜柱壓力升高,柱效下降,峰型異常,或在色譜圖中出現(xiàn)“鬼峰"。

2)蛋白類樣品累積:生物類樣品易在柱頭端累積,導(dǎo)致柱壓升高,柱效下降。

3)其他:如膠狀,絮狀等樣品通過過濾無(wú)法去除,也會(huì)積壓在篩板和柱頭端,引起柱壓升高。




—— 解決方案 ——

1

中藥等成分復(fù)雜的樣品

1)在方法開發(fā)時(shí),就盡量采用SPE小柱、萃取等方法盡量多去除一些雜質(zhì)。

2)使用保護(hù)柱,需要注意的是,保護(hù)柱的柱芯為耗材,不能長(zhǎng)期使用不更換,一旦超過柱芯的保護(hù)能力,強(qiáng)保留物質(zhì)還是會(huì)進(jìn)入色譜柱,因此,要關(guān)注柱壓,柱壓提高10%以上就建議更換柱芯。

3)對(duì)于檢測(cè)中藥復(fù)雜成分的柱子,建議定期按色譜柱說明書的異常再生方法進(jìn)行色譜柱維護(hù),目的是定期的去用洗脫能力較強(qiáng)的乙腈,異丙醇去反向沖洗色譜柱,去除柱頭端的強(qiáng)保留物質(zhì)。

4)如檢測(cè)這類產(chǎn)品的色譜柱出現(xiàn)超壓,柱效不符合等情況,建議客戶先按說明書的異常再生方法進(jìn)行處理。如還是不能解決,再按公司的有關(guān)規(guī)定,申請(qǐng)維修。

2

蛋白類樣品累積

1)使用SPE等更加有效的前處理方法。

2)定期進(jìn)行色譜柱維護(hù)沖洗,推薦去除蛋白溶劑(乙腈-水-三氟yi酸 = 50-50-0.1)。

3)使用保護(hù)柱。

4)因這類原因,柱子一旦出現(xiàn)柱壓升高,柱效下降的情況,維修后能恢復(fù)的可能性很小,所以建議客戶在使用過程中去定期維護(hù),并加保護(hù)柱。

3

其它

如膠狀,絮狀等樣品通過過濾無(wú)法去除,也會(huì)積壓在篩板和柱頭端,引起柱壓升高。這一類,最好在樣品處理或工藝上去解決。



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