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液相譜圖出現(xiàn)裂峰怎么辦?

更新時間:2023-02-10 點擊次數(shù):1185

在樣品檢測中,經(jīng)常會出現(xiàn)一個純度較高的單成分對照品,進樣后卻出現(xiàn)分裂峰,甚至直接呈兩個峰的狀態(tài)。除了色譜柱被污染,色譜柱損壞等原因外,還有可能是檢測方法不當(dāng),比如pH值不合適,離子試劑濃度不當(dāng)?shù)仍颉?/p>



實例一(離子對試劑濃度不當(dāng)):


離子對試劑與化合物結(jié)合后使保留時間得以延長,但如果離子對試劑的使用量不當(dāng),化合物與離子對結(jié)合不完整,導(dǎo)致待測成分部分結(jié)合,也會呈現(xiàn)兩種狀態(tài),導(dǎo)致峰分裂。

微信截圖_20230210162527.png

色譜柱:Ultimate® LP-C18 4.6×300mm,5μm

流動相:1g/L庚烷磺酸鈉(pH2.0):甲醇=90:10

微信截圖_20230210162539.png

流動相:2g/L庚烷磺酸鈉(pH2.0):甲醇=80:20

微信截圖_20230210162613.png

結(jié)論:離子對作為比較特殊的分離模式,其間往往作用力是多方作用,增加離子對能夠是兩個改善峰形,改善分裂峰,同時也可能需要微調(diào)其他條件來輔助。



實例二(pH值不當(dāng)):



酸堿性化合物在不同pH下呈現(xiàn)不同的狀態(tài),不合適的pH條件下化合物出現(xiàn)分子態(tài)和離子態(tài)共同存在的情況,導(dǎo)致峰分裂甚至直接呈兩個峰。

微信截圖_20230210162706.png

色譜柱:Ultimate® LP-C18 4.6×250mm,5μm

流動相:10mmol/L磷酸二氫鉀:甲醇=80:20

微信截圖_20230210162718.png

結(jié)論:調(diào)整流動相的pH后,使化合物在特定環(huán)境中保持穩(wěn)定且單一的狀態(tài),從而不呈現(xiàn)分裂峰。

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